染菌，这一发酵过程中的不速之客，指的是除了目标生产菌之外，其他微生物的意外侵入。这种情况破坏了发酵所需的纯种培养环境，严重时甚至可能导致整个发酵过程的失败。染菌不仅意味着大量原材料的浪费，更会在经济上造成难以估量的损失。此外，它还会降低发酵效率，给后续工序带来重重困难。因此，深入分析染菌的原因，并采取有效的预防措施，对于发酵工业而言至关重要。

当发酵罐遭遇染菌时，镜检分析成为确定杂菌类型的关键手段。若条件允许，还需对杂菌进行分离和进一步分析。同时，对发酵罐的无菌样本进行镜检，有助于追溯染菌的起始点。若有必要，还需检查种子罐的无菌样本，以判断染菌是否源于种子罐。

一、染菌原因的多维分析

从菌型角度考虑，若染菌为芽孢杆菌，可能源于培养基或设备灭菌不彻底，或空气中的微生物污染。

从染菌时间来看，发酵早期的染菌可能与种子带菌、培养基或设备灭菌不足、移种操作不当以及空气污染有关；而发酵后期的染菌则可能由补料时的污染、设备渗漏或操作失误引起。

从染菌规模上分析，若多个发酵罐同时出现同一种杂菌污染，很可能是空气系统出了问题；若个别罐连续染菌，则可能是设备本身的问题。发酵罐染菌是一个多因素交织的复杂问题。接下来，我们将从人、机、料、法、环等多个维度，探讨发酵罐染菌的分析思路及相应的纠正预防措施。

二、发酵染菌分析思路与纠正预防措施

1. 人为因素的影响

在抗生素生产的整个流程中，人的因素始终不可忽视。人为操作失误或不当处理，都可能导致染菌的发生。因此，在科学的生产工艺基础上，规范人员操作，制定并严格执行岗位操作规程，是确保生产顺利进行的关键。

例如，在升温过程中，若未达到100℃就控制排汽阀进行升压，可能会导致假压现象。这种情况下，罐内的不凝气体未被完全排出，保温保压过程无法彻底杀灭杂菌，反而增加了染菌的风险。此外，检修过程中的疏忽、保压期间未密切关注罐压变化等都可能导致灭菌不彻底。

纠正预防措施：

首先，需要判断人员操作失误是偶然性还是系统性问题。对于偶然失误，应对员工进行教育，强化其责任心；对于系统性问题，如操作规程中的空白或模糊区域，应在标准操作程序（SOP）中进行明确补充，并增加相应的检查记录。同时，对相关员工灭菌操作的前几批产品进行追踪调查，以排除习惯性操作带来的风险。此外，对全体员工进行染菌知识的培训，提高其责任意识和操作规范性。
 

2. 设备因素的影响

发酵罐在使用前需进行全面细致的检查，以消除潜在隐患。这包括搅拌系统的运转情况、密封性能、罐内螺丝紧固程度、管道通畅性以及夹层或盘管的泄露情况等。

发酵罐的设备问题可分为罐内设备和罐外设备两大类。罐内设备包括轴承、轴、搅拌盘、搅拌叶、蛇管、挡板和人梯等；罐外设备则涉及管线阀门，如主蒸汽、压出、取样、吹试镜、排污、入罐空气以及冷水进水和回水等管道系统，还有蒸汽入罐阀、吹试镜阀门、取样阀、压出阀、空气入罐阀、补料阀门、排污阀门和排气阀门等。

2.1 罐内部件

罐内部件的故障或损坏是导致染菌的常见原因之一。例如，罐内部件的脱落或受损会影响消毒效果；蛇管的渗漏会导致外部微生物进入；罐内死角可能成为微生物滋生的温床；轴封不严也会增加染菌风险。

纠正预防措施:设备相关因素引起的染菌要分析是设计缺陷造成的还是清洗、检修没有到位或只是偶然事件。如果设计有缺陷那么是否可以更正弥补、如果不能是否应该增加相关的操作来减少设计缺陷带来的影响;如果清洗、检修没有到位那么是否应该增加规定对清洗、检修的频次重新评估和确定。同时应该追踪评估该设备生产的前几批产品的情况，并检查其他设备的是否存在同样的问题。

当然我们应该根据实际问题具体原因具体分析，但无论是哪种原因我们都应该多问几个为什么以找到根本原因。

3.空气净化系统

防止空气净化系统带菌的主要措施有:提高空气进口的空气洁净度;除尽压缩空气中夹带的油和水，保持过滤介质的除菌效率。现在生产中空气系统有了很大的进步，不存在油的问题，但在夏秋两季，由于空气湿度较大可能出现预过滤器放出水的现象，因此各车间应根据车间实际情况，定时放水。另外，在过滤器灭菌时要防止过滤介质被冲翻或烧灼，还要防止发酵液倒流入空气过滤器内。

4.操作方法的影响

发酵罐染菌后应对相关操作如配料操作、移种操作、灭菌操作、取样操作、镜检操作、罐的运转情况、水电气的供应情况等进行排查以当班操作人员口述为主体、以相关记录为依据，核查以上操作是否有异常情况。

5.环境因素

染菌后应对操作环境包括菌种环境、物料存放环境、接种(移种)环境等进行回顾，以当班员工复述为主体、以为记录依据，检查当时是否有异常情况。

物料存放现场应干燥、整洁，有防蝇防鼠装置。配料的操作环境应整洁、无积水、物料摆放整齐、无变质、发霉的原材料。

灭菌压差接种环境应符合要求，现场应无积水、灰尘、无料液，环境整洁;门窗关闭严密，并应在接种前对环境进行消毒。

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